남자 1명, 5명의 여성을 대상으로 했으며 face lift 환자들을 대상으로 하였다. 환자의 나이는 45세에서 65세 사이였습니다.

국소마취하에 복부에서 30cc의 지방을 채취하여 각각 2가지 protocol로 처리했습니다.

첫번째는 stromal vascular fraction의 분리를 위해 하나의 시린지에 3000rpm으로 3분간 돌리고 원심분리후 바닥에 있는 pellet을 효소처리없이 분리했습니다.

Stromal vascular fraction이 포함된 regenerative cells이 풍부한 pellet을 추출한뒤에 adipocytes 1cc와 섞은뒤 right preauricular region, tragus 하방 2cm에 subdermal layer에 injection했습니다.

주입은 retrograde injection으로 1.5mm blunt-tipped cannula로 주입했다.

다른 시린지로부터 또 다른 pellet은 mesenchymal cell fraction의 quantitative analysis를 위해 flow cytometry를 이용하여

mesenchymal cells의 수를 측정하여 평균 16204+/-5516 mesenchymal stem cells을 보여주었습니다.

흡입한 지방의 일부를 stem cells의 expansion을 위해 보내고 expansion후에 expanded stem cells을 0.9% saline에 희석하여

0.4cc의 볼륨으로 2 10⁶ mesenchymal stem cells을 left preauricular area(1cm²area)에 tragus하방 2cm에 subdermal로 주입했습니다.

두가지 이유 때문에 fresh isolated ADSC를 사용하기 보다 expanded ADSC를 사용했는데,

첫째는 줄기세포의 수가 결과의 quality에 영향을 미칠수 있는지 여부이고 그렇다면 불충분한 지방을 가진 환자에서 반복해서 주입할 수 있기 때문입니다.

주입전에는 피부와 피하조직을 preauricular area에서 제거하여 광학현미경과 전자현미경으로 형태학적 조사를 하고,

expanded stem cells과 fat과 stromal vascular fraction을 주입한 곳의 피부와 피하조직에서 3개월후에 조직검사를 시행했습니다.

Biopsy specimens 0.5*1cm를 둘로 쪼개어 하나의 0.5*0.5cm는 histologic / immunohistochemical study를 위해 보내고,

다른 하나는 전자현미경으로 histomorphometric analysis를 위해 보냈다. 첫번째 skin biopsy(untreated skin biopsy)는 양쪽 preauricular area에서 fat harvesting과 동시에 시행했고,

이때 우측에 fat과 stromal vascular fraction을 주입하고 5주후에 expanded mesenchymal stem cells을 주입했습니다.

Fat graft/stromal vascular fraction 혹은 expanded mesenchymal stem cells로 치료후 3개월뒤 second biopsy를 시행했는데

우측은 face lift하기 5주전에 시행했고, expanded mesenchymal stem cells을 만들기 위한 5주간의 시간이 필요하기 때문에 왼쪽에는 face lift와 동시에 시행했습니다.

 Results

Aged Facial Skin

Posttreatment Biopsies of the skin: fat and stromal fraction

Posttreatment biopsies of the skin: expanded mesenchymal stem cells

Direct comparison between light and EM